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【关键词】 色谱法,高压液相；奈韦拉平；血药浓度
【关键词】 色谱法，高压液相；奈韦拉平；血药浓度
奈韦拉平（nevirapine）是人体免疫缺陷病毒(HIV1)的非核苷类逆转录酶抑制剂(NNRTI). 奈韦拉平与HIV1的逆转录酶(RT)直接连接并通过使此酶的催化端断裂来阻断RNA依赖和DNA依赖的DNA聚合酶活性［1-2］. 奈韦拉平不与底物或三磷酸核苷产生竞争. 我们旨在摸索一种简便、快速、专属性高的测定奈韦拉平血浆浓度的方法.
1材料和方法
1.1材料安捷伦1100液相色谱仪（美国安捷伦公司生产）；低温高速离心机（德国SIGMA公司生产）；振荡器（美国科尔帕默仪器公司生产）；万分之一天平（上海衡平仪器仪表厂生产）. 甲醇、乙腈，色谱纯，Merck公司生产；磷酸、磷酸二氢钠、三氯乙酸、三乙胺，AR级，上海化学试剂公司生产. 受试制剂：国产奈韦拉平胶囊剂（商品名艾极），批号0309001，每粒200 mg，浙江华海药业股份有限公司生产；国产奈韦拉平片剂（商品名艾太），批号0402004，每片200 mg，浙江华海药业股份有限公司生产；参比制剂： 进口奈韦拉平片（商品名维乐命），批号304185d，每片200 mg，德国勃林格殷格翰生产；奈韦拉平标准品，批号556503002，含量99.8%，浙江华海药业股份有限公司提供.
1.2方法
1.2.1色谱条件色谱柱： Hypersil C18柱（150 mm×4.6 mm, 0.5 μm）；流动相： 乙腈: 0.01 mol/L磷酸二氢钠（含0.01 mol/L三乙胺，磷酸调pH至5.0）=18:82；流速： 1.0 mL/min；柱温： 45℃；检测波长： 240 nm；进样量： 25 μL；灵敏度： 0.01AUFS.
1.2.2定性获取空白血浆、加入标准品的血浆样品和待测血浆样品的二维色谱图，比较所测成分的保留时间及检测波长是否一致.
1.2.3血浆样品的预处理取0.2 mL血浆样品，加入20 μL 500 mL/L三氯乙酸，漩涡振荡，4℃下离心5 min（15000 r/min），取上清液25 μL进样，作HPLC分析.
1.2.4标准曲线的制备取健康人的空白血浆0.2 mL数份，加入奈韦拉平标准品，使其浓度分别为0.1, 0.5, 1.0, 2.0, 3.5和5.0 mg/L，按血浆样品处理项处理后作HPLC分析. 以样品峰面积（A）对药物浓度（C）进行线性回归，计算回归方程.
1.2.5回收率与精密度考察配制含奈韦拉平的标准品0.2, 2.5, 4.5 mg/L的系列血样，日内各浓度重复进样5次，日间各浓度测定1次，连续测定5 d，以所测的浓度与已知浓度相比，计算血样中奈韦拉平的相对回收率和日内、日间精密度.
1.2.6药代动力学参数计算Cmax, tmax用实测值表示，AUC0-t用梯形法计算. AUC(0-∞)=AUC(0-t) Ct/λZ, Ct为最后一点的血药浓度，λZ为末端相消除速度常数，t1/2可按t1/2=0.693/λZ求出.