TILLING(targeting induced local lesions in genomes)技术作为反向遗传学的一个重要研究工具,其中CEL(celery)Ⅰ酶是TILLING技术的核心内切酶。实验通过硫酸铵沉淀、亲和层析、阴阳离子交换柱层析等常规的蛋白质纯化过程,从芹菜(Apium graveolens)中粗纯化了CELⅠ酶。以杂合双链DNA为底物,检测了CELⅠ酶在不同纯化程度、不同温度、不同处理时间以及有无TaqDNA聚合酶条件下的错配切割活性。结果表明,所获得的CELⅠ酶得到了粗纯化;CELⅠ酶的最适活性温度范围为45～50℃;处理时间长达150min时,CELⅠ酶仍能特异识别并切割错配碱基;在含有TaqDNA聚合酶的酶切体系中,CELⅠ酶错配切割效果更佳。与其它单位提供的CELⅠ酶活性相比,实验粗分离纯化的CELⅠ酶的酶切条带更亮,说明其活性更好。通过对CELⅠ酶的提取及活性分析,为TILLING技术大规模和低成本地应用于家蚕功能基因组研究提供了保障。