- 2008-09-18 13:37:44【微生物学】A simple, rapid procedure for the isolation o
- A simple, rapid procedure for the isolation of DNA for PCR from Gibberella fujikuroi (Fusarium section Liseola)N.M. DuTeau and J.F. Leslie - Department of Plant Pathology, Throckmorton Hall, Kansas St.... [阅读全文]
- 2008-09-18 13:42:13【微生物学】Assessment of Magnaporthe grisea mating type
- Assessment of Magnaporthe grisea mating type by spore PCR
Jin-Rong Xu and John E. Hamer - Department of Biological Sciences Purdue University, West Lafayette, IN 47907
Isolation of DNA from filament.... [阅读全文]
- 2008-10-19 15:00:24【遗传学】PCR过程（flash）下载
- PCR过程（flash）下载点击下载：PCR过程 .... [阅读全文]
- 2009-06-14 01:56:06【制药学】基因的 PCR扩增（聚合酶链式反应）
- 基因的 PCR扩增（聚合酶链式反应）实验目的
1. 学习PCR反应的基本原理与实验技术。
2. 了解引物设计的一般要求。实验原理
单链DNA在互补寡聚核苷酸片段的引导下，可以利用DNA聚合酶按5’→3’方向复制.... [阅读全文]
- 2009-06-15 12:38:55【PCR】Real time PCR检测单核苷酸多态性（single nucle
- Real time PCR检测SNP的方法是： 针对目标基因片段的突变位点，设计两条引物，这两条引物的区别仅仅是末端的1-2个碱基不同，分别与突变位点匹配。共同的下游引物和探针。然后扩增。就可以得到不同的CT值，根据CT值.... [阅读全文]
- 2009-07-07 05:21:28【PCR】PCR产物测序：利用核酸外切酶 I和热敏磷酸酶去除
- --利用核酸外切酶 I和热敏磷酸酶去除引物和dNTPs去除引物和dNTPs试试核酸外切酶Ⅰ和热敏磷酸酶！
PCR反应完毕后，产物里通常还混有PCR引物和过量的dNTPs--如果产物还要进行测序，那你一定要去除它们！
通常我们采用.... [阅读全文]
- 2009-07-07 05:41:01【理论基础】AluPCR：用重复序列引物扩增来源复杂的人DNA
- 引言
聚合酶链反应PCR使不同来源的特异核酸片段的分离及分析发生了革命，但应用PCR分 离，分析特定DNA区域需要了解靶区域的边侧序列，这使扩增局限于已知DNA序列。我 们研究了从复杂的人和其他种DNA混合物中扩.... [阅读全文]
- 2009-07-08 13:04:34【免费软件】PCR 引物设计及软件使用技巧
- PCR 引物设计及软件使用技巧
张新宇，朱有康，高燕宁
（中国协和医科大学中国医学科学院肿瘤研究所，北京100021） 摘要：本文旨在介绍使用软件设计PCR 引物的技巧。在PCR 引物设计原则的基础上，详
细介绍了两.... [阅读全文]
- 2007-12-03 17:42:11【PCR】RT-PCR之本人研究心得
- 本文讨论的范围包括RNA酶保护分析，northernblot，原位杂交，半定量RT-PCR和定量RT-PCR。本文不谈具体protocol，是因为各种书籍和kit说明书上都有，主要说一些原则，而且大部分是失败和成功的经验，还有小组讨论结.... [阅读全文]
- 2007-12-04 20:35:50【PCR】PCR primers design 引物设计及软件使用技巧
- 自从1985 年Karny Mullis 发明了聚合酶链式反应以来，PCR 技术已成为分子生物学研究中使用最多、最广泛的手段之一[1]，而引物设计是PCR 技术中至关重要的一环。使用不合适的PCR 引物容易导致实验失败：表现为扩增出目.... [阅读全文]
- 2007-12-04 23:06:35【PCR】PCR扩增不出只是引物有问题吗？
- PCR扩增不出就引物有问题吗？.... [阅读全文]
- 2007-12-04 23:06:21【PCR】PCR扩增有很强的非特异条带，说明引物有污染吗？
- PCR扩增有很强的非特异条带，说明引物有污染吗？.... [阅读全文]
- 2008-07-30 00:49:48【PCR】Real-Time PCR Method detect sequence-specific
- Real-time PCR is able to detect sequence-specific PCR products as they accumulate in "real-time" during the PCR amplification process. As the PCR product of interest is produced, real-time.... [阅读全文]
- 2008-07-30 00:52:30【PCR】Real-Time PCR—— the TaqMan
- This web page was produced as an assignment for an undergraduate course at Davidson College.
Introduction: The advent of Polymerase Chain Reaction (PCR) by Kary B. Mullis in the mid-1980s revo.... [阅读全文]
- 2008-07-30 01:03:59【PCR】定量PCR Taqman探针试剂的选择技术
- 由于ABI公司在定量PCR领域的领导地位和在推广定量PCR技术上的贡献，Taqman探针可以说是当下荧光定量PCR中使用最多最广的方法之一，特别是在临床疾病检测上。我们大致可将产品分为2大类，一是已经带有标记探针的特定基.... [阅读全文]
- 2008-07-30 01:09:49【PCR】实时荧光定量PCR实验体系的设计与优化（pcr理论体
- 时荧光定量PCR以其精确、快速、方便，越来越多的应用在科研、临床及检验检疫的各个领域。但是定量PCR是对精确性要求很高的实验，不仅要求在实验前有比较完整的实验设计方案，而且实验的条件对实验结果的影响也非.... [阅读全文]
- 2008-07-30 01:09:49【PCR】实时荧光定量PCR实验体系的设计与优化（pcr理论体
- 时荧光定量PCR以其精确、快速、方便，越来越多的应用在科研、临床及检验检疫的各个领域。但是定量PCR是对精确性要求很高的实验，不仅要求在实验前有比较完整的实验设计方案，而且实验的条件对实验结果的影响也非.... [阅读全文]
- 2008-07-30 01:16:58【PCR】定量PCR Taqman探针设计基本要领
- 自90年代Taqman探针诞生以来，虽然荧光探针（引物）不断有新的技术出现，但是作为一种经典的定量PCR技术，Taqman探针技术仍然是许多实验研究人员进行定量检测的首选，这主要是因为相对于SYBR荧光染料，Taqman探针具有.... [阅读全文]
- 2008-07-30 01:18:30【PCR】实时荧光定量PCR技术：定量分析功能及软件应用技
- 定量PCR除可以对样品的初始浓度进行准确定量外，还有其它多种丰富的应用。还包括基因表达调控情况的分析、等位基因的分析等，那么这些功能是如何在一台定量PCR仪上实现的呢？下面将进行一一介绍。利用标准曲线对样品.... [阅读全文]
- 2008-07-30 01:21:11【PCR】也谈PCR方法中常见的污染问题及对策
- 反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）是一种体外核酸扩增技术，它具有特异、敏感、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点，能在几个小时内完成从一根毛发、一滴血、甚至一个细胞中扩增出足量的目的产物供分析研究和检测.... [阅读全文]
- 2008-07-30 01:25:07【PCR】LP Recco PCR Cloning Kit（LP Recco enzyme clo
- No restriction enzyme, directional cloning of any gene or sequence of interest into any vector
The LP Recco enzyme cloning technology allows cloning your gene or sequence of interest into any vector.... [阅读全文]
- 2008-07-30 02:45:34【PCR】PCR from Plant Tissue（collect piece of tissu
- Reference: Klimyuk et.al., 1993, Plant J. 3:493-494 Last updated: 1/27/00 By: Kay Schneitz collect piece of tissue (e.g., pieces of a leaf or flower) in Eppendorf tube containing 40 ml 0.25 N NaOH .... [阅读全文]
- 2008-07-30 02:49:47【PCR】PCR技术综述（基本技术）
- 一滴残留在裙子上的精液使得美国总统Bill Clinton不得不坦承他与白宫实习生有不正当的关系。因为他知道现在的生物科技就连一个精子也能被用来做为证据。这种将极微量的生物标本化为可供鉴定的现代技术正是PCR(Polyme.... [阅读全文]
- 2008-07-30 02:55:57【PCR】PCR扩增分离目的DNA片段（PCR反应基本技术）
- 一、目的
了解多聚合酶链反应DNA 扩增技术的基本原理和实验应用，掌握PCR反应基本技术。
二、原理
PCR（Polymerase Chain Reaction）即聚合酶链式反应是1986 年由Kallis Mullis 发现。这项技术已广泛地应用于分子.... [阅读全文]
- 2008-07-30 02:58:55【PCR】PCR技术——多聚酶链式反应（Polymerase Chain R
- 1 导论
多聚酶链式反应（Polymerase Chain Reaction, PCR）是美国Perkin-Elmer/Cetus公司人类遗传研究室Mullis K. B.等人于1985年发明的一种快速体外DNA片段扩增技术，是八十年代分子生物学资源领域的一项革命性突.... [阅读全文]
- 2008-07-30 02:56:54【PCR】PCR的优越性与局限性（聚合酶链反应）
- 聚合酶链反应即PCR技术，因为其对基因或特定核酸序列在短时间内的极大的扩增效率，已在感染性疾病、肿瘤、遗传病、寄生虫病、法医学、动植物和考古等的诊断和研究中得到了广泛的应用，并在某些方面几乎是难以替代.... [阅读全文]
- 2008-07-30 03:05:34【PCR】PCR技术的原理与方法之定义和基本原理
- PCR定义
PCR（Polymerase Chain Reaction）即聚合酶链式反应，是指在DNA聚合酶催化下，以母链DNA为模板，以特定引物为延伸起点，通过变性、退火、延伸等步骤，体外复制出与母链模板DNA互补的子链DNA的过程。是一.... [阅读全文]
- 2008-07-30 03:02:17【PCR】PCR技术的原理与方法之反应的成分和作用与影响因
- •PCR反应的成分和作用
总体积：一般为25μl～100 μl
（一）无Mg2 buffer：由纯水、kcl、Tris组成。Tris用于调节反应体系pH值，使Taq酶在偏碱性环境中反挥活性。kcl可降低退火温度，但不能超过50 mmol/L，.... [阅读全文]
- 2008-07-30 03:11:14【PCR】PCR技术的原理与方法之常见问题、相关技术以及应
- PCR常见问题
一.没有扩增产物
1.循环温度：变性温度、退火温度
2.引物设计
3.DNA聚合酶活性
4.抑制性成份(蛋白酶、核酸酶、其它抑制聚合 酶活性的成份)
5、DNA样品
二.非特异产物及电泳呈涂布状
1.M.... [阅读全文]
- 2008-08-01 01:18:17【PCR】Troubleshooting for PCR and multiplex PCR（来
- Troubleshooting discussion is based on the PCR protocol as described in the table below. All reactions are run for 30 cycles. COMPONENTVOLUMEFINAL CONCENTRATION1.autoclaved ultra-filtered water (pH 7..... [阅读全文]
- 2008-08-01 01:19:30【PCR】PCR产物的电泳检测时间
- 一般为48h以内，有些最好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚致消失。
假阴性，不出现扩增条带
PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量及， ④PCR循环条件。寻找原因亦应.... [阅读全文]
- 2008-08-01 03:02:12【PCR】PCR反应体系与反应条件的选择
- 标准的PCR反应体系： 10×扩增缓冲液 10ul 4种dNTP混合物 各200umol/L 引物 各10～100pmol 模板DNA 0.1～2ug Taq DN.... [阅读全文]
- 2008-08-01 03:05:29【PCR】小结：PCR技术在突变基因检测中的应用
- 基因突变(gene mutation)是遗传病和肿瘤发生的根本原因，检测与遗传病及恶 性肿瘤发生有关的突变基因(mutant gene)是分子生物学，医学遗传学及肿瘤学研究 的热点，它对阐明遗传病和肿瘤发生的分子生物学基础及其.... [阅读全文]
- 2008-08-01 03:10:23【PCR】总结：PCR技术
- PCR的最早设想 核酸研究已有100多年的历史，本世纪60年代末、70年代初人们致力于研究基因的体外分离技术，Korana于1971年最早提出核酸体外扩增的设想：“经过DNA变性，与合适的引物杂交，用DNA聚合酶延伸引物，并不断.... [阅读全文]
- 2008-08-01 03:24:56【PCR】小结：PCR使用技巧
- 基本PCR引物设计参数
引物设计的目的是在两个目标间取得平衡：扩增特异性和扩增效率。特异性是指发生错误引发的频率。特异性不好或劣等的引物会产生额外无关和不想要的PCR扩增子，在EB染色的琼脂糖凝胶上可见到；引.... [阅读全文]
- 2008-08-01 03:26:29【PCR】PCR技术中分析误差及其消除方法
- 第一节 准确度和精密度在任何一项分析中，我们都可以看到用同一种方法分析，测定同一样品，虽然经过多次测定，但是测定结果总不会是完全一样，这说明测定中有误差。为此我们必须了解误差的产生原因及其表示方法，尽可.... [阅读全文]
- 2008-08-01 03:27:38【PCR】定量PCR及其相关技术
- 定量PCR 定义 以参照物为标准对PCR终产物进行分析或对PCR过程的进行监测，来评估样本中靶基因的拷贝数，称为定量PCR相对定量→绝对定量， 手工操作→自动化检测， 灵敏度与特异性多有很大的提高。 定量PCR的可行性 定.... [阅读全文]
- 2008-08-01 03:28:42【PCR】小结：PCR实用技巧
- 增加PCR的特异性：
1. primers design
这是最重要的一步。理想的，只同目的序列两侧的单一序列而非其它序列退火的primer要符合下面的 一些条件
a. 足够长,18-24bp,以保证特异性.当然不是说越长越好,太长的prim.... [阅读全文]
- 2008-08-01 03:29:37【PCR】详细经典的PCR技术
- 1.PCR反应的最适条件
4．1 TaqDNA聚合酶
在早期进行的PCR反应中，使用的是大肠杆菌DNA聚合酶1的大片段，，即Klenow片段。也曾有人用噬菌体T4 DNA聚合酶。这两种酶的共同弱点是对热不稳定性，DNA合成反应只能在370C.... [阅读全文]
- 2008-08-01 03:31:10【PCR】经典实验：聚合酶链式反应(PCR)扩增和扩增产物克
- 聚合酶链式反应(PCR)扩增和扩增产物克隆
概 述
PCR(Polymerase Chain Reaction,聚合酶链反应)是一种选择性体外扩增DNA或RNA的方法.它包括三个基本步骤: (1) 变性(Denature):目的双链DNA片段在94℃下解链; (2).... [阅读全文]
- 2008-08-01 03:32:29【PCR】简单入门：PCR技术概论
- 聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点；能在一个试管内将所要研究 的目的基因或某一DNA片段.... [阅读全文]
- 2008-08-17 12:11:50【PCR】PCR实用技巧(PCR基础知识)
- 增加PCR的特异性：
1. primers design
这是最重要的一步。理想的，只同目的序列两侧的单一序列而非其它序列退火的primer要符合下面的 一些条件
a. 足够长,18-24bp,以保证特异性.当然不是说越长越好,太长的prim.... [阅读全文]
- 2008-08-17 12:13:36【PCR】PCR常见问题分析与对策
- 一般为48h以内，有些最好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚致消失。 2.假阴性，不出现扩增条带
PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量及， ④PCR循环条件。寻找原因亦应.... [阅读全文]
- 2008-08-17 12:15:19【PCR】PCR各处应用模式
- 一、兼并引物（Degenerate Primer）PCR 密码子具有兼并性，如表22-4，单以氨基酸顺序推测编码的DNA序列是不精确的，但可以设计成对兼并引物，扩增所有编码已知顺序的核酸序列。用兼并引物时寡核苷酸中核苷酸序列.... [阅读全文]
- 2008-08-17 12:58:18【PCR】Purification of PCR fragments for cloning(PCR
- (adapted from Bruce A. Roe, Department of Chemistry and Biochemistry, The University of Oklahoma, Norman, Oklahoma 73019 broe@ou.edu)After an aliquot of the PCR mixture is analyzed on an agarose gel, .... [阅读全文]
- 2008-08-17 13:11:40【PCR】PCR on Worms
- (adapted from Mike Krause)
1. Harvest worms (1 plate is plenty) in 1-2 ml of water into a 1.5ml eppendorf tube.2. Spin (1 min, 15,000 rpm), and remove excess water without disturbing worm pellet.3. A.... [阅读全文]
- 2008-08-17 13:28:26【PCR】PCR和RT－PCR常见问题及解答
- 问 题可能原因建议解决方法RT-PCR灵敏度：在琼脂糖凝胶分析中看到少量或没有RT-PCR产物RNA被降解在用来验证完整性之前先在变性胶上分析RNA
使用良好的无污染技术分离RNA
在将组织从动物体取出后立刻处理
在100％甲.... [阅读全文]
- 2008-08-17 13:29:54【PCR】聚合酶链式反应（PCR）实验方法
- 聚合酶链式反应（PCR）
聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法，为最常用的分子生物学技术之一。典型的PCR由（1）高温变性模板；（2）引物与模板退火；（3）引物沿.... [阅读全文]
- 2008-08-17 13:31:59【PCR】增加PCR特异性
- 1、引物设计 细心地进行引物设计是PCR中最重要的一步。理想的引物对只同目的序列两侧的单一序列而非其他序列退火。设计糟糕的引物可能会同扩增其他的非目的序列。下面的指导描述了一个可以增加特异性的引物所具有.... [阅读全文]
- 2008-08-17 13:37:04【PCR】Protocol for PCR using Taq DNA Polymerase
- General Advice PCR allows the production of more than 10 million copies of a target DNA sequence from only a few molecules. The sensitivity of this technique means that the sample should not be contam.... [阅读全文]