生物制药工艺学实验教学大纲

序号

实验项目名称

内 容 及 要 求

实验类型

实验学时

备注

1.

银耳多糖的制备及分析

1．  掌握提取银耳多糖的原理。

2．  学习热水提取银耳多糖，掌握离心技术。

3．  学习多糖溶液中蛋白质的去除：氯仿变性除去杂蛋白。

4．  掌握有机溶剂沉淀方法及注意事项。

5．  掌握多糖含量测定方法与原理，正确使用分析天平。

综合

18

2

质粒DNA的提取、酶切及电泳检测

1．  掌握碱裂解法小量提取质粒DNA原理。

2．  学习碱裂解法小量提取质粒DNA的方法：注意时间准确。

3．  掌握酶切DNA原理和基本操作。

4．  学习琼脂糖电泳的基本操作，观察结果。

综合

12

3

弹性蛋白酶的制备及分析

1．掌握离子交换技术的原理。

2．学习以胰脏为原料利用动态离子交换技术制备弹性蛋白酶的方法。

3．掌握用专一性底物（刚果红弹性蛋白）测定胰蛋白酶活性的原理与方法。

综合

18

4

氯化血红素的制备及分析

1．  了解氯化血红素制备方法、作用及其应用前景。

2．  掌握从猪血中制备氯化血红素的工艺原理和过程。

3．  掌握氯化血红素含量测定的原理和方法。

4．  掌握离心技术、渗透压法破碎细胞及热变性除去蛋白质。

5．  学习旋转蒸馏装置安装、检漏和拆卸。

综合

12

5

重组蛋白的表达和鉴定

1．  掌握微生物培养的基本操作。

2．  了解基因工程重组蛋白的表达过程和电泳样品的处理。

3．  掌握SDS-PAGE电泳的基本原理和应用

4．  学习SDS-PAGE电泳操作方法：注意电泳槽的安装和胶配制

5．  学习电泳图谱的绘制和目的蛋白条带相对分子质量的分析。

综合

24

6

固定化细胞法生产L－天冬氨酸

1．  了解细胞固定化常用的方法，学习包埋法制备固定化细胞。

2．  掌握固定化细胞法生产L－天冬氨酸的原理及基本操作。

3．  掌握固定化细胞酶活力、转化率及半衰期测定的原理和方法。

综合

24

7

溶菌酶结晶的制备和分析

1．  掌握静态离子交换、盐析、结晶等基本操作技术及注意事项。

2．  学习以鸡蛋清为原料制备溶菌酶结晶的方法。

3．  了解酶活力测定的原理与方法。

4．  掌握SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质分子量的原理和方法。

综合

18

8

亲和层析法纯化胰蛋白酶抑制剂

1．  了解制备固定化酶的一般原理和过程。

2．  掌握用溴化氰作活化剂使酶（蛋白质）偶联于多羟基惰性材料的方法。

3．  掌握亲和层析法纯化蛋白质的一般过程和原理。

4．  掌握胰蛋白酶活力测定的一般原理和方法。

综合

18

9

低分子量肝素的制备与测定

1．  了解化学裂解法制备低分子量肝素的过程。

2．  掌握乙醇沉淀法的基本操作及注意事项。

3．  掌握生色底物法测定低分子量肝素活性的原理与方法。

综合

18

10

酵母RNA的制备和单核苷酸的分离

1．  掌握利用稀碱法从酵母提取RNA的原理和操作技术。

2．  掌握利用离子交换法分离单核苷酸的原理和操作技术。

综合

18

11

天然生物活性物质的发现研究

1.         掌握多肽、蛋白质或多糖类物质的提取、分离、纯化的一般手段与方法；

2.         掌握多肽、蛋白质或多糖类物质纯度检定的方法；

3.         掌握多肽、蛋白质或多糖类物质分子量检测的方法；

4.         掌握多肽、蛋白质或多糖类物质含量测定的方法；

5.         学习从资料收集、具体品种工艺设计、制备以及质量控制、数据的收集处理、归纳总结、撰写相关的报告等一个完整的研究过程。

设计

72

12

重组蛋白类药物的表达、制备及分析

1.         掌握重组工程菌的培养和重组蛋白表达方法。

2.         掌握重组工程菌及重组蛋白的鉴定方法；

3.         掌握重组蛋白纯度及分子量的鉴定方法；

4.         掌握重组蛋白含量的测定方法；

5.         掌握电泳的基本操作和对目的条带观察分析；

6.    学习从资料收集、目的基因获得、重组体构建、工程菌的克隆与鉴定、目的蛋白的表达、纯化制备以及质量控制、数据的收集处理、归纳总结、撰写相关的报告等一个完整的研究过程。

设计

72

上述实验中选做126学时实验，综合设计性实验为100%。