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  • 2008-09-14常用菌种保藏方法大全
  • 微生物具有容易变异的特性,因此,在保藏过程中,必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态,才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。   低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要.... [阅读全文]
  • 2008-09-14细菌的十二大生理、生化试验简介
  • 微生物生化反应是指用化学反应来测定微生物的代谢产物,生化反应常用来鉴别一些在形态和其它方面不易区别的微生物。因此微生物生化反应是微生物分类鉴定中的重要依据之一,微生物检验中常用的生化反应介绍如下:一.... [阅读全文]
  • 2008-09-14厌氧菌的七大培养法
  • 厌氧菌在有氧的情况下不能生长。要培养厌氧菌,必须创造一个无氧的环境。通常用培养基中加入还原剂,或用物理、化学方法去除环境中的游离氧,以降低氧化还原电势。如疱肉培养基、硫基乙酸钠培养基,牛心脑浸液培.... [阅读全文]
  • 2008-09-14细菌总数的测定方法
  • 1、计数器测定法:  即用血细胞计数器进行计数。取一定体积的样品细胞悬液置于血细胞计数器的计数室内,用显微镜观察计数。由于计数室的容积是一定的(O.1mm3),因而根据计数器刻度内的细菌数,可计算样品中的含菌数.... [阅读全文]
  • 2008-09-14包涵体定义
  • "包涵体" 在工具书中的解释1、主要是巨细胞病毒(亦可为麻疹病毒)感染引起的。受染细胞变圆、增大,出现胞浆内嗜酸性并聚积于胞浆一侧的小体(即嗜酸性包涵体)和细胞核内嗜酸或双嗜性占据核中央区大部分的呈紫.... [阅读全文]
  • 2008-09-14包涵体的洗涤、溶解、复性以及纯化
  •  关于包涵体的纯化是一个令人头疼的问题,包涵体的复性已经成为生物制药的瓶颈,关于包涵体的处理一般包括这么几步:菌体的破碎、包涵体的洗涤、溶解、复性以及纯化,内容比较庞杂 

    一、菌体的裂解.... [阅读全文]
  • 2008-09-14核酸杂交技术检测病原微生物
  • 核酸杂交技术是根据两条互补的核苷酸单链可以杂交结合成双链的原理所建立,用一段已知序列的放射性或非放射性标记的核苷酸单链做探针,与待检标本中的DNA杂交来探查待检标本中有无与之相互补的核酸。该方法特异性.... [阅读全文]
  • 2008-09-14从阿维菌素产生菌生产阿维菌素试验方案
  • 培养基(1)斜面和分离培养基(g/L):可溶性淀粉10,(NH4)2SO4 2.5,NaC1 0.6,MgSO ·7H2O 1.2,K2HPO4·3H2O 3.0,CaCO3 3.0,琼脂粉 20,pH 7.2~7.4,用蒸馏水配制。种子培养基(g/L):玉米淀粉25,花生饼.... [阅读全文]
  • 2008-09-14三大测定抗菌药物最低抑菌浓度(MIC)方法
  • 1.1.常量肉汤稀释法1.1.1.抗菌药物贮存液制备 抗菌药物贮存液浓度不应低于1000μg/ml(如1280μg/ml)或10倍于最高测定浓度。溶解度低的抗菌药物可稍低于上述浓度。抗菌药物直接购自厂商或相关机构。所需抗菌药物溶液量.... [阅读全文]
  • 2008-09-01药品卫生检验方法
  • 药品卫生检验方法通则一、供试品取样及注意事项1.供试品取样应有一定数量,以使检验结果有代表性。因此,正常的供代品,一般每悠批应随机抽取两瓶或两盒以上的包装单位。检验时每次量少应分取两瓶(盒)以上的样品共.... [阅读全文]
  • 2008-08-31PCR方法检测病原微生物
  • 多聚酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)是一种模拟天然DNA复制过程,在体外扩增特异性DNA(或RNA)片段的新技术。本实验是将待检双链DNA经94℃高温变性成单链作模板,然后加入一对人工合成的寡核苷酸引物,引.... [阅读全文]
  • 2008-08-31菌种保存和微生物常识
  • 菌种保存和微生物常识
    1、常用培养基的制备、灭菌与消毒
    营养:从外部环境摄取其生命活动所必需的能量和物质,满足生长和繁殖需要的一种生理过程。是生命活动的物质基础,是生命活动的起点。
    营养物:具有营养功.... [阅读全文]
  • 2008-08-31细菌的生物化学试验
  • 各种细菌具有各自独特的酶系统,因而对底物的分解能力不同,其代谢产物也不同。用生物化学方法测定这些代谢产物,可用来区别和鉴定细菌的种类。利用生物化学方法来鉴别不同细菌,称为细菌的生物化学试验或称生化反应.... [阅读全文]
  • 2008-08-31阿维菌素试验方案
  • 培养基
    (1)斜面和分离培养基(g/L):可溶性淀粉10,(NH4)2SO4 2.5,NaC1 0.6,MgSO ·7H2O 1.2,K2HPO4·3H2O 3.0,CaCO3 3.0,琼脂粉 20,pH 7.2~7.4,用蒸馏水配制。
    种子培养基(g/L):玉米淀粉25,花.... [阅读全文]
  • 2008-08-31几种测定抗菌药物最低抑菌浓度(MIC)方法
  • 1.1.常量肉汤稀释法
    1.1.1.抗菌药物贮存液制备 抗菌药物贮存液浓度不应低于1000μg/ml(如1280μg/ml)或10倍于最高测定浓度。溶解度低的抗菌药物可稍低于上述浓度。抗菌药物直接购自厂商或相关机构。所需抗菌药物溶液.... [阅读全文]
  • 2008-08-31工业微生物产生菌的分离筛选全攻略
  • 菌株分离(separation)就是将一个混杂着各种微生物的样品通过分离技术区分开,并按照实际要求和菌株的特性采取迅速、准确、有效的方法对他们进行分离、筛选,进而得到所需微生物的过程。菌株分离、筛选(screen.... [阅读全文]
  • 2008-08-31Blunt end cloning of PCR products
  • End repair: Add 5-10 units of T4 DNApol and incubate at 37C for 5 minutes.
    Make solution to 2.5 M NH4OAc and add 1 volume of 95% ethanol; let sit for 5 minutes at RT and spin at 14K x g for 20 minut.... [阅读全文]
  • 2008-08-31Cloning PCR products using TA vectors
  • Cloning PCR products using TA vectorsby Paul N. Hengen, Ph.D. *Methods and reagents is a unique monthly column that highlights current discussions in the newsgroup bionet.molbio.methds-reagnts, availa.... [阅读全文]
  • 2008-08-31PEG PRECIPITATION OF PCR PRODUCTS
  • PEG PRECIPITATION OF PCR PRODUCTS
    This protocol can be used instead of EXO/SAP for removing excess primers and nucleotides from PCR products before cycle-sequencing. Protocol:1. After PCR, add the fo.... [阅读全文]
  • 2008-08-31PCR的污染与对策
  • PCR反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性,但令人头痛的问题是易污染,极其微量的污染即可造成假阳性的产生.污染原因
      (一)标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染,或标本放置时,由于密.... [阅读全文]
  • 2008-08-31减少pcr产物中引物二聚体的方法
  • 减少引物二聚体的方法
    1. 从引物自身着手,重新设计引物,这是最根本解决这一问题的办法;
    2. 可能模板有问题;
    3. 模板浓度过小,适当加大模板量;
    4. Taq酶,引物,Mg2+浓度可能过高,可降低它们的浓度;
    5. .... [阅读全文]
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