实验目的：
1、了解冰冻切片技术；
2、了解Gomori氏法显示酸性磷酸酶的基本原理；
3、掌握Gomori氏法显示酸性磷酸酶的方法。
实验原理：
一、 冰冻切片技术
冰冻切片技术是将已固定或新鲜的组织用冰冻结（冰内包埋），并用冰冻切片机切片的一种方法。
这种切片法常用于医院对病理组织的制片和组织与细胞化学的制片。
此法有两个优点：（1）制片速度快：用此法从取材到切片制成，可以在15min内完成。而用常规石蜡包埋切片技术制作切片约需24h以上。而在医院临床，手术的取出物（如肿瘤块）需要急速做出诊断时，显然用石蜡包埋切片技术是不行的。（2）保存或保护组织内某些易被溶解或破坏的物质，比如，脂类物质易被酒精溶解，酶易被破坏等。所以应用该技术可以进行脂类、酶类的组织细胞化学实验。
缺陷：所切的片子较厚，又不能作连续切片，还容易破碎，制片效果不如石蜡包埋切片技术。所以在非特殊情况下一般采用石蜡包埋切片技术。
二、酸性磷酸酶的显示方法
我们所进行的是显示酸性磷酸酶的组织化学实验（在组织切片上进行的化学反应，从而在组织或细胞原位上显示某种成分在组织或细胞内的存在与分布）。
酸性磷酸酶主要位于溶酶体内，是溶酶体的标志酶，而具有吞噬作用的细胞（如单核细胞、巨噬细胞、中性粒细胞）中溶酶体含量最多，在吞噬过程中溶酶体起着十分重要的作用。
Gomori氏法显示酸性磷酸酶的原理：细胞中的酸性磷酸酶分解底物（β-甘油磷酸钠）而释放出磷酸基，在pH5.0的环境中，磷酸基与硝酸铅反应，形成磷酸铅。但因其是无色的，所以再经过与硫化铵的作用，形成棕黑色的硫化铅沉淀。由此而显示酸性磷酸酶在细胞内的存在和分布。
为避免假阳性出现，需做对照：（1）孵育液中不加底物；或（2）加热，使酶失活。
实验材料与试剂：小鼠（鱼）脾、解剖器械（平皿、小剪子、小镊子）、镊子、冰冻切片机、冰箱、37℃恒温箱、90℃干燥箱、显微镜、大小染色缸、载玻片、盖玻片、1%冰醋酸、1%硫化铵（现配）、苏木精液、蒸馏水、0.9%氯化钠、甲醛钙液（无水氯化钙10g，甲醛100ml，蒸馏水900ml）。
0.2M醋酸盐缓冲液（pH4.6）： A液： 冰醋酸 1.16ml
蒸馏水 100ml
B液： 醋酸钠•3H2O 2.72g
蒸馏水 100ml
缓冲液（pH4.6）：A液51.0 ml + B液49.0 ml
酸性磷酸酶孵育液（临时现配）:
蒸馏水 90ml
0.2M醋酸盐缓冲液 12ml
5%硝酸铅 2ml
3.2%β-甘油磷酸钠 4ml