初步掌握供体-受体原生质体融合产生胞质杂种的方法,了解胞质杂种产生的原理和意义。
二、实验原理:
体细胞杂种有核杂种(nuclear hybrid)和胞质杂种(cybrid)之分。前者指双亲完整原生质体的融合产物,后者是指一亲本的去核原生质体,(即胞质体cytoplast)与另一亲本完整原生质体融合的产物,胞质杂种一般只具有一个亲本的细胞核,而具有两个亲本细胞质的遗传物质,胞质杂交可用来转移细胞质基因所决定的遗传性状,如胞质雄性不育特征,抗除草剂特性,对某些抗生素的抗性,以及一些与光合作用有关的特性,通过产生胞质杂种来转移这些特性具有明显的优点,因而在遗传育种中具有特殊重要意义,供体受体原生质体融合(donor-recipient protoplast fusion)系统是产生胞质杂种的有效方法。经过不断的改良,现已普遍采用双失活程序(Menczel,1984)。即将一个亲本的原生质体经辐射处理使细胞核失活,来作为细胞质供体,另一亲本(受体)用代谢抑制物碘乙酸盐类处理,使细胞质暂失活。由于生理互补效应,杂种细胞可以生长和持续分裂。因而在双失活处理的供体-受体原生质体融合系统中,不需要双新具有选择标志,杂种即可被筛选出来。