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ACP 酸性磷酸酶的显示方法

2007-12-03 12:05:14      相关论文 相关书籍
Tags:ACP  酸性磷酸酶 显示方法 细胞学 ACP 酸性磷酸酶的显示方法

一、实验目的
1. 掌握Comori 法的基本原理和方法。
2. 观察酸性磷酸酶在细胞内的分布状况。
 
二、实验原理
酸性磷酸酶能分解磷酸脂而释放出磷酸基,在PH5.0 的环境中,磷酸基能与铅盐反应形成磷酸铅。但因其是无色的,所以再经过与硫化铵作用,形成棕黑色的硫化铅沉淀,由此就能显示酸性璃酸酶在细胞内的存在与分布。
本实验的技术特点是:

①用冷冻涂片和中性福尔马林固定,可避免在固定、包埋及制片过程中酶的失活,保证了实验的稳定性。

②采用较短的作用时间,可避免细胞质内其它蛋白质及核内出现阳性假象,保证了实验的可靠性。

③以姬姆萨染色的巨噬细胞为观察对象,细胞核及细胞轮廓以及细胞质中反应沉淀的颗粒都比较清晰,有助于深入理解细胞吞噬作用、浴酶体功能和分布以及溶酶体标志酶——酸性磷酸酶的性质。 
 

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