一、主要内容
维生素A的定性测定,维生素B1的定性测定,维生素B2的定性测定
(一)原理
维生素A与SbCl3作用生成兰色,此兰色反应虽非维生素A的特异反应(如胡萝卜素亦有类似反应,不过呈色程度很弱),但一般可用作维生素A的定性测定。维生素B1,在碱性条件下与赤血盐作用,在紫外线照射下,发生兰色荧光。
注意:SbCl3遇水生成碱式盐[Sb(OH)2Cl],再变成氯氧化锑(SbOCl),此化合物与维生素A不作用,并发生混浊,妨碍实验进行。
(二)操作:
维生素A:
取干燥试管一支,加1~2滴维生素A及十滴氯仿,混匀,加醋酐2滴及SbCl3-氯仿液2ml,观察颜色变化并记录之。
注意:
1.实验所用仪器和试剂须干燥无水,加醋酐的目的在于脱水。
2.凡接触过SbCl3的玻璃仪器需先用10%盐酸溶液洗涤后,再用水冲洗。
维生素B1 :
1.取试管一支,加维生素B1注射液1~2滴,蒸馏水5ml,0.5N氢氧化钠溶液3ml,1%铁氰化钾约0.5ml,丁醇约2ml,充分振荡。
2.静置十分钟左右,待分层后在暗室中用紫外灯照射丁醇层,观察发生兰白色荧光。
维生素B2:取试管一支,加维生素B2注射液1~2滴,蒸馏水5~10ml,摇匀,在暗室用紫外灯照射,观察发生绿色荧光。
二、课堂安排
每人一组进行实验。注意观察现象。
思考题与习题
1.了解维生素A、B1、B2的生理用途?